22 марта, 2023

hleb

Находите все последние статьи и смотрите телешоу, репортажи и подкасты, связанные с Россией.

Исследование показало, что подштамм BA.2 Omicron менее патогенен на моделях грызунов, чем предыдущие варианты SARS-CoV-2.

В недавнем исследовании, опубликованном в поле поиска* Допечатный сервер, который считается природный кошелек В журнале исследователи оценили патогенность и рецидивы вызывающего беспокойство варианта SARS-CoV-2 (VOC) линии Omicron, BA.2 у иммунокомпетентных мышей и хомяков.

Стади: Характеристика и противовирусная чувствительность SARS-CoV-2 Omicron/BA.2. Изображение предоставлено: Тобиас Архельгер / Shutterstock

Омикрон имеет четыре подлинии: BA.1, BA.1.1, BA.2 и BA.3. В то время как первоначальный вариант BA.1 стал доминирующим вариантом во многих странах, варианты BA.2 начали доминировать на Филиппинах, в Индии и Дании, и предварительные данные показали, что они более трансмиссивны, чем вариант BA.1.

Мутанты белка шипа (S) SARS-CoV-2, а именно. E484K N501Y, D614G и P681H/R, среди прочих, влияют на инфекцию, патогенность, трансмиссивность, пролиферацию видов и антигенность. По сравнению с эталонным штаммом Wuhan/Hu-1/2019 вариант BA.2 содержит 31 аминокислотную замену в белке S. Хотя варианты BA.1 и BA.2 имеют 20 общих мутаций S, BA.2 содержит 11 изменений. аминокислоты в BA.1 отсутствуют.

Среди них четыре мутации белка S, включая K417N, E484K и N501Y в BA.2, являются основными, ответственными за адаптацию мышей. Поэтому исследователи предположили, что BA.2 заразит иммунокомпетентных мышей и размножит их органы дыхания, как это было показано ранее с вариантами BA.1.

об учебе

В текущем исследовании исследователи прививали самкам мышей BALB/c 105 Блякообразующие единицы (БОЕ) BA.1 или BA.2 или фосфатно-солевой буфер (PBS) (плацебо) перед оценкой веса.

В этом исследовании использовали самцов сирийских хомяков дикого типа в возрасте от пяти до шести недель. Исследователи прививали этим подопытным животным 103 или 105 БОЕ Омикрона/БА.2 или БА.1, после чего в течение 10 дней проводили ежедневный контроль массы тела.

Для вирусологических и патологических анализов они выбрали по четыре инфицированных крысы из каждой группы. Этих животных подвергали эвтаназии через три и шесть дней после инфицирования (Pi) их назальных конъюгатов и легких. Используя анализ VeroE6/трансмембранной трансмембранной протеазы серин 2 (TMPRSS2) на клетках VeroE6, исследователи измерили титры вируса в роговице носа и легких.

READ  Намибия прекращает использование российской вакцины против COVID-19 Sputnik V из-за опасений по поводу ВИЧ в ЮАР

Они провели эти эксперименты с SARS-CoV-2 в лабораториях повышенного уровня биобезопасности 3 (BSL3) в Токийском университете и Национальном институте инфекционных заболеваний Японии.

После получения информированного согласия они собрали образцы дыхательных путей и плазмы у пациентов с атипичной пневмонией, инфицированных коронавирусом 2019 (COVID-19) и вакцинами соответственно.

Для синтеза генов они использовали аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей нескольких моноклональных антител человека против S (MAb). Синтезированные гены клонировали в плазмиду для экспрессии белков и переносили в клетки СНО.

Исследователи использовали колонку с белком А для получения очищенных моноклональных антител; Кроме того, перед использованием они подтвердили свою чистоту с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Результаты

У мышей варианты омикронов BA.2 и BA.1 показали слабую патогенность.

Масса тела мышей не изменилась после заражения BA.1, BA.2 или PBS, а плетизмография всего тела (WBP) показала, что Penh или Rpef не изменились в группах, инфицированных BA.1 или BA.2, по сравнению с группа инфицированных плацебо. Penh и Rpef являются суррогатными признаками бронхоконстрикции и обструкции дыхательных путей соответственно.

Хотя титры вируса в носовых раковинах мышей BALB/c, инфицированных BA.1 или BA.2, были сходными; Однако при пяти днях на дюйм титры вируса в легких в группе 2 инфицированных были в 33 раза ниже, чем в группе, инфицированной BA.1.

Гистопатологический анализ легких мышей BALB/c, инфицированных BA.1 или BA.2, показал, что инфильтрация воспалительных клеток вокруг бронхов и в альвеолярные пространства была минимальной через два и пять дней после заражения. Общая обнаруживаемая и антигенная вирусная РНК была снижена у мышей, инфицированных BA.1 и BA.2, что указывает на то, что BA.1 и BA.2 показали значительно более низкую легочную инфекцию, чем бета-вариант SARS-CoV-2.

Что касается воспалительных реакций в легких мышей BALB/c, то они показали такие же уровни цитокинов/хемокинов через один, два или три дня, как и у мышей, не подвергавшихся лечению.

У трансгенных мышей K18-hACE2 при трех днях на дюйм титры вируса в легких и роговице носа были в 400–1000 раз ниже в дыхательных путях животных, инфицированных BA.2, чем у мышей, инфицированных WA1/2020 D614G.

READ  Новые материалы для аккумуляторов, магнитов и микроэлектроники

Omicron/BA.2 и BA.1 показали аналогичную патогенность для сирийских хомячков.

У сирийских хомяков, инокулированных ВА.1 или ВА.2, не было обнаружено изменений в весе, Penh или Rpef. В отличие от того, что наблюдалось у мышей, при трех днях на дюйм титры вируса в носовой полости хомяков были выше при БА.1, чем при БА. 2, несмотря на дозу вакцинации.

Вирусные легочные титры с титром 103 Прививочная доза БОЕ БА.2 была в 100 раз ниже, чем при 103 ПФУ от БА.1.

Кору носа и легкие пяти крыс, инокулированных смесью 1:1 BA.1 и BA.2, собирали при четырех днях на дюйм для секвенирования следующего поколения (NGS). Анализ NGS показал, что BA.1 стал доминировать в носовых мыщелках всех пяти пораженных животных, что указывает на то, что он превзошел BA.2 во время удвоения верхних дыхательных путей у хомяков.

Анализ микро-КТ показал, что при семи DPI у всех хомяков, инфицированных BA.2, наблюдались минимальные аномалии легких и отсутствие консолидации легких. В целом, у 62,5% (5 из 8) хомяков, инфицированных BA.1, наблюдались идентичные симптомы с минимальной пневмонией.

Гистопатологические изменения в легких хомяков, инфицированных БА.1 или БА.2, свидетельствуют о том, что БА.1 и БА.2 в основном поражали бронхи. В целом, эти результаты показали, что патологическая способность Omicron/BA.1 и Omicron/BA.2 была одинаковой в модели хомяка.

Реакция антител на вариант Omicron/BA.2.

Титр нейтрализации против BA.2 устанавливали с помощью теста нейтрализации со снижением концентрации (FRNT).

Авторы отмечают, что 50% FRNT (FRNT50) Средние геометрические титры в плазме, взятые у лиц, иммунизированных третьей дозой вакцины BNT162b2 против BA.1, BA1.1 и BA.2, были в 3,4–5,9 раза ниже по сравнению с таковыми против штаммов WA1/2020 D614G и дельта.

Это снижение эквивалентных титров было одинаковым для всех трех вирусов Омикрон; Однако это снижение было больше для ВА.1 и ВА.1.1, чем для ВА.2 как через 1, так и через 3 месяца после вакцинации.

READ  Космические исследователи изучают происхождение материи Млечного Пути

Принимая во внимание, что образцы плазмы от реципиентов вакцины против COVID-19, у которых была проникающая дельта- или омикронная инфекция, показали повышенный FRNT.50 Значения по сравнению с дельта-вариантом, эти значения оставались в 3,3-4,9 раза ниже по сравнению с тремя штаммами Омикрон. Таким образом, указание на то, что индуцированные вакциной антитела или инфекция SARS-COV-2 снижали нейтрализующую активность против BA.2 по сравнению с другими штаммами Omicron.

Эффекты моноклональных антител и противовирусных соединений в отношении варианта Omicron/BA.2 متغير

Три терапевтических препарата MAPS REGN10987/REGN10933, COV2-2196/COV2-2130 и S309 ограничивали репликацию вируса в легких хомяков, инфицированных BA.2.

Авторы оценивали терапевтическую эффективность противовирусных соединений, таких как молонооперавир, S-217622 и др., у интраназально инфицированных хомячков с 103 ПФУ от БА.2. Эти соединения растворяли в 0,5% метилцеллюлозе путем в естественных условиях эксперименты. Затем животных лечили через желудочный зонд два раза в день (каждые 12 часов) в течение одного, двух или трех дней 1000 мг/кг/день молонооперавира, 120 мг/кг/день S-217622 или 2000 мг/день. кг/сутки нирматрилевира, начиная с 24 ч B

Все три соединения эффективно ингибируют пролиферацию ВА.2 в нижних дыхательных путях хомяков. Кроме того, у животных, получавших S-217622, ​​наблюдалось снижение инфекции верхних дыхательных путей.

Выводы

В целом результаты исследования показали почти такую ​​же чувствительность и патогенность, что и вариант Омикрон/ВА.2. лицом к лицу Вариант Omicron/BA.1 у мышей и хомяков. Кроме того, результаты показывают, что Omicron/BA.2 потенциально ограничен некоторыми терапевтическими MAb и противовирусными соединениями, находящимися в клиническом применении или в стадии разработки.

*Важная заметка

Препринты Research Square публикуют предварительные научные отчеты, которые не прошли рецензирование, и поэтому их не следует считать окончательными, направлять клиническую практику/поведение, связанное со здоровьем, или рассматривать как установленную информацию.